產品名稱:水質(糞)大腸菌群檢驗紙片
產品編號與包裝規格:
產品編號 | 產品類型 | 包裝規格 |
060030 | 紙片 | 10 份/盒(10mL 水樣量紙片 5 袋,1mL 水樣量紙片 10 袋) |
060070 | 紙片 | 10 份/盒(1mL 水樣量紙片 15 袋) |
產品用途:廣泛應用于生活飲用水、飲用天然礦泉水的水源水、地表水和廢水中總大腸菌群和糞大腸菌群的檢測。
水質(糞)大腸菌群檢驗紙片檢驗原理:
按 MPN法,將一定量的乳糖、指示劑(溴甲-酚紫和 2,3, 5-氯化三苯基四氮唑即 TTC)以及營養成分等吸附于一定面積的無菌濾紙上,在特定的溫度(37℃ 或 44.5℃)培養24h,當細菌生長繁殖時,產酸使 PH值降低,溴甲-酚紫指示劑由紫色變黃色。同時,產氣過程相應的脫氫酶在適宜的 PH值范圍內,催化底物脫氫還原 TTC 形成紅色的不溶性三苯甲臜(TTF),即可在產酸后的黃色背景下顯示出紅色斑點(或紅暈)。通過上述指示劑的顏色變化就可對是否產酸產氣作出判斷,從而確定是否有總大腸菌群或糞大腸菌群存在,再通過查 MPN表 就可得出相應總大腸菌群或糞大腸菌群的濃度值。
使用方法:
1、接 種:每個樣品按三個10倍遞減的不同接種量接種,每個接種量分別接種5袋紙片,共接種15袋紙片。
清潔水樣(選用產品編號為 060030 的紙片),接種水樣總量為55.5mL, 10mL水樣量紙片5袋,每袋接種水樣10mL,1mL水樣量紙片10張,其中5張各接種水樣1mL,另5袋各接種 1:10的稀釋水樣1mL。
受污染水樣(選用產品編號為 060070 的紙片),接種3個不同稀釋度的1mL稀釋水樣各5袋。接種水樣應均勻滴加在紙片上,紙片充分浸潤、吸收水樣,然后用手在塑膜袋外側輕輕撫平,做好標記,袋口朝上豎直放置于恒溫培養箱培養。
2、培養:檢測總大腸菌群時,在36℃-38℃條件下培養18~24h后觀察結果;檢測糞大腸菌群時,在44.5±0.5℃的條件下培養18~24h 后觀察結果
3、結果判讀:
(1)紙片上出現紅斑或紅暈且周圍變黃,為陽性。
(2)紙片全片變黃,無紅斑或紅暈,為陽性。
(3)紙片部分變黃,無紅斑或紅暈,為陰性。
(4)紙片的紫色背景上出現紅斑或紅暈,而周圍不變黃,為陰性。
(5)紙片無變化,為陰性。
4、結果報告:根據不同接種量的陽性紙片數量,查相應的 MPN 表(見 HJ 755-2015 附錄 B),按公式(1)換算并報告 1L水樣中總大腸菌群或糞大腸菌群數:
公式(1):C=100×M/Q
C-水樣總大腸菌群或糞大腸菌群濃度(MPN/L)
M-查 MPN 表得到的 MPN 值(MPN/100mL)
Q-實際水樣最大接種量(mL)
100-為 10×10mL,其中,10 將 MPN 值的單位 MPN/100mL 轉換為 MPN/L,10mL 為 MPN 表中最大接種量。
5、結果表示:測定結果保留二位有效數字,大于等于 100 時以科學計數法表示,結果的單位為 MPN/L。平均值以幾何平均計算。
質量控制:
1,理化指標:加水后,紙片 pH 值 7.0-7.3。
2,本品接種下列菌株,置于溫箱中培養 18-24h,結果如下:
指標 | 質控菌株及編號 | 培養溫度 | 特征性反應 |
生長率 | 大腸埃希氏菌ATCC25922 | 36~38℃ | 紙片變黃,并在黃色背景上呈現紅點或片狀紅暈。 |
金黃色-葡萄球菌ATCC6538 | 紙片保持紫色不變 | ||
大腸埃希氏菌ATCC25922 | 44.5±0.5℃ | 紙片變黃,并在黃色背景上呈現紅點或片狀紅暈。 | |
產氣腸桿菌ATCC13048 | 紙片保持紫色不變 |
儲存條件與保質期:2-8℃避光貯存,并注意防潮,保質期一年,如發現紙片變為粉紅色即為失敗。
注意事項:
1、水樣采集后 2h 內檢測,否則,需 10℃以下冷藏并 6h 內送檢,實驗室接樣后,應將樣品放入 0-4℃冰箱并 2h 內測定。
2、為避免紙片加入水樣后,短時間內變黃或退色,如果采集水樣含有余氯或經過加氯處理,需在采樣瓶滅菌前加入硫代-硫酸鈉(0.1g/mL)0.2mL (10mg 硫代-硫酸鈉可保證去除水樣中 1.5mg 余氯,硫代-硫酸鈉用量克根據水樣實際余氯量調整);如果采集水樣重金屬含量較高,需在采樣瓶滅菌前加入乙-二胺四乙酸二鈉(EDTA- Na2)溶液(0.15g/mL)0.6mL,以消除干擾。酸性樣品,需在分析前按無菌操作要求調節樣品的 pH 值至 7.0-8.0。
3、檢測糞大腸菌群時,紙片接種后應立即放置于 44.5±0.5℃的恒溫培養箱中培養,在常溫下放置過久將影響檢測結果的準確性。
4、質檢報告可以登錄環凱G方網站, 打開“質檢報告"頁面,輸入產品批號下載。
廢物處理:檢測之后帶菌物品置于121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。
執行標準:Q/HK 0706-廣東環凱微生物科技有限公司企業標準 微生物檢驗卡
參考文獻:
1,《水和廢水監測分析方法(第四版)》
2,GB/T 5750.12-2006 中華人民共和國國家標準 生活飲用水標準檢驗法
3,GB 8538-2016 中華人民共和國國家標準 飲用天然礦泉水檢驗方法
4,HJ 755-2015 水質 總大腸菌群和糞大腸菌群的測定 紙片快速法
水質總大腸菌群和糞大腸菌群測試紙片 10mL&1mL(HJ755標準)
水質總大腸菌群和糞大腸菌群測試紙片 10mL&1mL(HJ755標準)