產品名稱:第一鏈cDNA合成試劑盒
英文名稱:1st Strand cDNA Synthesis Kit
產品編號與包裝規格:
編號 | 產品名稱 | 規格 | 產品介紹 | 產品價格 |
HKE041-01B | 第一鏈cDNA合成試劑盒 | 100次 | 1st Strand cDNA Synthesis Kit | 1075 |
產品描述:第一鏈 cDNA 合成試劑盒(1st Strand cDNA Synthesis Kit)是以 mRNA 或者總 RNA 為模板, 效 合成第一鏈 cDNA。本試劑盒使用 Reverse Transcriptase 反轉錄酶(Cat.No: HKE123),它的 RNase H 的活性與 AMV 反轉錄酶相比較低。該反轉錄酶可耐受 42~50°C 溫度。試劑盒中含有重組RNA 酶抑制劑(Cat. No:HKE125),可耐受 55°C 高溫,有效防止RNA 降解;同時含有 Oligo(dT)18,用于以有 poly(A)尾 巴的mRNA 為模板合成 cDNA;本試劑盒也可采用基因特異性引物。合成的第一鏈 cDNA 能直接用作 PCR 或熒光定量 PCR 的模板,第 二鏈 cDNA 的合成或線 性 RNA 擴增,也可用于需要用帶有放射性或非放射性核苷酸標記第一鏈 cDNA 的實驗。
產品特點:
環凱生物反轉錄酶無 RNase H 活性,可避免第一鏈 cDNA 合成過程中,RNA/DNA 雜交模板鏈中 RNA 解,保證 cDNA合成的質量。
反轉錄反應可使用 Random N6 或 Oligo(dT)18 為引物,也可同時使用 Random N6 和 Oligo(dT)18 做引物,或使用基因特異性引物進行反轉錄。
保存溫度:-20℃。
產品包裝:
注意事項:
1)用 DEPC 處理實驗用到的所有實驗器材,或購買已經證明無核酸酶的實驗用具,實驗過程戴手套并經常更換手套,避免 RNA 酶的污染。
2)確保所用試劑中無 RNA 酶污染。
3)試劑盒要嚴格密封保存。在反轉錄過程中,所有管子確保扣嚴。
4)純化過的 RNA 必須保證不含有鹽,金屬離子,乙醇和本酚,以上成分會干擾第一鏈 cDNA 合成反應??刹捎靡掖汲恋?RNA 的方法去除掉痕量污染物。
5)為保證反轉錄反應有效進行,需使用高質量的 RNA 模板。
6)有實驗結果提示,本反轉錄酶可在 15 分鐘內完成 1kb 反轉錄反應。
操作方法:
常用PCR 循環: